Principe :
Hygiène et sécurité :
Les déchets organiques issus de plantes transgéniques ou de mutants sont jetés dans la poubelle Biohazard.
Matériel nécessaire :
- Boîtes de pétri de 50mm.
- Pinces fines nettoyées avec un papier absorbant imbibé d'alcool entre chaque plante.
- Microscope inversé.
- (Optionnel) Compteur
Réactifs :
Solution de germination :
- 1 % p/v Acide Borique,
- 3 % p/v ((Nitrate de calcium|Ca(NO3)2)),
- 0,4 % p/v MgSO4,
- 3 % p/v KH2PO4
- 25 % p/v Polyéthylène glycol-25000.
Le pH de la solution a été ajusté à 5,2.
Mode opératoire :
Test de germination :
- Verser 1 mL de tampon dans une boite de pétri 50mm.
- Prélever une fleur entière.
- Avec une pince, éventrer les étamines pour faire tomber le pollen dans le tampon.
- Laisser germer 4 h à l’obscurité et à température de la serre (pour ne pas créer de choc thermique en les transportant jusqu'au laboratoire).
- Une fois les 4 h écoulées, amener les boites de pétri et observer la germination grâce à un microscope inversé.
Remarques :
- Toujours faire la comparaison avec une plante sauvage.
- Le tube pollinique peut sortir du grain de pollen et éclater : ces cas sont comptabilisés dans les grains de pollen germés.
- Penser à faire jouer la mollette de focalisation car les grains de pollen sont répartis sur toute l’épaisseur du liquide.
- Compter environ 200 grains de pollen pour chaque fleur et environ 1000 à 2000 pour déterminer le % de germination des grains de pollen d’une plante.
Références :
http://www.agrireseau.qc.ca/apiculture/documents/rapport_final_Fraise_distributeur.pdf