Solutions pour Western Blot
Tampon running (séparation des protéines)
Pour 250ml de solution :
Produits
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Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 250 ml
| |
EDTA disodique | |
372.2 | |
8mM | |
0.745g | |
Tris | |
121.2 | |
1.5M | |
45.4g | |
SDS | |
288.38 | |
0.4% | |
1g | |
Ajuster le pH à 8.8
| |
Stocker la solution à 4°C
Tampon stacking (concentration des protéines)
Pour 100ml de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 100 ml
| |
EDTA disodique | |
372.2 | |
8mM | |
0.298g | |
Tris | |
121.2 | |
0.5M | |
6.1g | |
SDS | |
288.38 | |
0.4% | |
0.4g | |
Ajuster le pH à 6.8
| |
Stocker la solution à 4°C
Tampon de migration
Pour 10L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 10L
| |
EDTA disodique | |
372.2 | |
1mM | |
3.72g | |
Tris | |
121.2 | |
25mM | |
31g | |
Glycine | |
75.07 | |
196mM | |
147g | |
SDS | |
288.38 | |
0.1% | |
10g | |
Tampon de transfert
Pour 2L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 2L
| |
Méthanol | |
32.04 | |
20% | |
0.4L | |
Tris | |
121.2 | |
25mM | |
6.2g | |
Glycine | |
75.07 | |
196mM | |
29.4g | |
SDS | |
288.38 | |
0.05% | |
1g | |
TBS 10X
Pour 1L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 1L
| |
Tris | |
121.2 | |
0.2M | |
24.2g | |
NaCL | |
58.44 | |
1.35M | |
80g | |
Ajuster le pH à 7.6 avec HCl
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Solution de saturation pour la membrane du Western Blot
Pour 300ml de solution :
Produits
| |
Concentration finale
| |
Pour 300ml
| |
TBS 10X | |
1X | |
30ml | |
Lait écrémé en poudre | |
3% | |
9g | |
Tween 20 | |
0.2% | |
600µl | |
H2O | |
qsp 300ml | |
Solution de lavage :
Pour 1500ml de solution :
Produits
| |
Concentration finale
| |
Pour 1.5L
| |
TBS 10X | |
1X | |
150ml | |
Lait écrémé en poudre | |
0.5% | |
7.5g | |
Tween 20 | |
0.1% | |
1.5ml | |
H2O | |
qsp 1500ml | |