Loading...
 

Western blot

    Solutions pour Western Blot


    



    



    Tampon running (séparation des protéines)



    Pour 250ml de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Masse molaire (g/mol)
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 250 ml
            
        
        
            
                
                    EDTA disodique
            
             
                
                    372.2
            
             
                
                    8mM
            
             
                
                    0.745g
            
        
        
            
                
                    Tris
            
             
                
                    121.2
            
             
                
                    1.5M
            
             
                
                    45.4g
            
        
        
            
                
                    SDS
            
             
                
                    288.38
            
             
                
                    0.4%
            
             
                
                    1g
            
        
        
            
                
                    Ajuster le pH à 8.8
            
        
    


    Stocker la solution à 4°C



    



    



    Tampon stacking (concentration des protéines)



    Pour 100ml de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Masse molaire (g/mol)
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 100 ml
            
        
        
            
                
                    EDTA disodique
            
             
                
                    372.2
            
             
                
                    8mM
            
             
                
                    0.298g
            
        
        
            
                
                    Tris
            
             
                
                    121.2
            
             
                
                    0.5M
            
             
                
                    6.1g
            
        
        
            
                
                    SDS
            
             
                
                    288.38
            
             
                
                    0.4%
            
             
                
                    0.4g
            
        
        
            
                
                    Ajuster le pH à 6.8
            
        
    


    Stocker la solution à 4°C



    



    



    Tampon de migration



    Pour 10L de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Masse molaire (g/mol)
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 10L
            
        
        
            
                
                    EDTA disodique
            
             
                
                    372.2
            
             
                
                    1mM
            
             
                
                    3.72g
            
        
        
            
                
                    Tris
            
             
                
                    121.2
            
             
                
                    25mM
            
             
                
                    31g
            
        
        
            
                
                    Glycine
            
             
                
                    75.07
            
             
                
                    196mM
            
             
                
                    147g
            
        
        
            
                
                    SDS
            
             
                
                    288.38
            
             
                
                    0.1%
            
             
                
                    10g
            
        
    


    



    



    



    Tampon de transfert



    Pour 2L de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Masse molaire (g/mol)
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 2L
            
        
        
            
                
                    Méthanol
            
             
                
                    32.04
            
             
                
                    20%
            
             
                
                    0.4L
            
        
        
            
                
                    Tris
            
             
                
                    121.2
            
             
                
                    25mM
            
             
                
                    6.2g
            
        
        
            
                
                    Glycine
            
             
                
                    75.07
            
             
                
                    196mM
            
             
                
                    29.4g
            
        
        
            
                
                    SDS
            
             
                
                    288.38
            
             
                
                    0.05%
            
             
                
                    1g
            
        
    


    



    



    



    



    TBS 10X



    Pour 1L de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Masse molaire (g/mol)
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 1L
            
        
        
            
                
                    Tris
            
             
                
                    121.2
            
             
                
                    0.2M
            
             
                
                    24.2g
            
        
        
            
                
                    NaCL
            
             
                
                    58.44
            
             
                
                    1.35M
            
             
                
                    80g
            
        
        
            
                
                    Ajuster le pH à 7.6 avec HCl
            
        
    


    



    



    Solution de saturation pour la membrane du Western Blot



    Pour 300ml de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 300ml
            
        
        
            
                
                    TBS 10X
            
             
                
                    1X
            
             
                
                    30ml
            
        
        
            
                
                    Lait écrémé en poudre
            
             
                
                    3%
            
             
                
                    9g
            
        
        
            
                
                    Tween 20
            
             
                
                    0.2%
            
             
                
                    600µl
            
        
        
            
                
                    H2O
            
             
                
                    
            
             
                
                    qsp 300ml
            
        
    


    



    



    Solution de lavage :



    Pour 1500ml de solution :



    

 

    
        
            
                
                    Produits
            
             
                
                    Concentration finale
            
             
                
                    Pour 1.5L
            
        
        
            
                
                    TBS 10X
            
             
                
                    1X
            
             
                
                    150ml
            
        
        
            
                
                    Lait écrémé en poudre
            
             
                
                    0.5%
            
             
                
                    7.5g
            
        
        
            
                
                    Tween 20
            
             
                
                    0.1%
            
             
                
                    1.5ml
            
        
        
            
                
                    H2O
            
             
                
                    
            
             
                
                    qsp 1500ml