Solutions pour Western Blot
Tampon running (séparation des protéines)
Pour 250ml de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 250 ml
| |
| EDTA disodique | |
| 372.2 | |
| 8mM | |
| 0.745g | |
| Tris | |
| 121.2 | |
| 1.5M | |
| 45.4g | |
| SDS | |
| 288.38 | |
| 0.4% | |
| 1g | |
Ajuster le pH à 8.8
| |
Stocker la solution à 4°C
Tampon stacking (concentration des protéines)
Pour 100ml de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 100 ml
| |
| EDTA disodique | |
| 372.2 | |
| 8mM | |
| 0.298g | |
| Tris | |
| 121.2 | |
| 0.5M | |
| 6.1g | |
| SDS | |
| 288.38 | |
| 0.4% | |
| 0.4g | |
Ajuster le pH à 6.8
| |
Stocker la solution à 4°C
Tampon de migration
Pour 10L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 10L
| |
| EDTA disodique | |
| 372.2 | |
| 1mM | |
| 3.72g | |
| Tris | |
| 121.2 | |
| 25mM | |
| 31g | |
| Glycine | |
| 75.07 | |
| 196mM | |
| 147g | |
| SDS | |
| 288.38 | |
| 0.1% | |
| 10g | |
Tampon de transfert
Pour 2L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 2L
| |
| Méthanol | |
| 32.04 | |
| 20% | |
| 0.4L | |
| Tris | |
| 121.2 | |
| 25mM | |
| 6.2g | |
| Glycine | |
| 75.07 | |
| 196mM | |
| 29.4g | |
| SDS | |
| 288.38 | |
| 0.05% | |
| 1g | |
TBS 10X
Pour 1L de solution :
Produits
| |
Masse molaire (g/mol)
| |
Concentration finale
| |
Pour 1L
| |
| Tris | |
| 121.2 | |
| 0.2M | |
| 24.2g | |
| NaCL | |
| 58.44 | |
| 1.35M | |
| 80g | |
Ajuster le pH à 7.6 avec HCl
| |
Solution de saturation pour la membrane du Western Blot
Pour 300ml de solution :
Produits
| |
Concentration finale
| |
Pour 300ml
| |
| TBS 10X | |
| 1X | |
| 30ml | |
| Lait écrémé en poudre | |
| 3% | |
| 9g | |
| Tween 20 | |
| 0.2% | |
| 600µl | |
| H2O | |
| qsp 300ml | |
Solution de lavage :
Pour 1500ml de solution :
Produits
| |
Concentration finale
| |
Pour 1.5L
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| TBS 10X | |
| 1X | |
| 150ml | |
| Lait écrémé en poudre | |
| 0.5% | |
| 7.5g | |
| Tween 20 | |
| 0.1% | |
| 1.5ml | |
| H2O | |
| qsp 1500ml | |
