Cette extraction se fait sur 50mg de poudre, en utilisant du DNAzol.
Protocole :
- Ajouter 200µl dans chaque tube de poudre
- Vortexer au Ribolyser, 2x20s, à vitesse maximale
- Placer en agitation sur une plaque pendant 5 min
- Ajouter 200µl d’un mélange chloroforme / acide isoamylique (24:1)
- Vortexer
- Placer en agitation sur une plaque pendant 5 min
- Centrifuger 10 minutes à 12000g
- Récupérer le surnageant
- Ajouter 150µl d’éthanol 100%
- Mélanger pour faire précipiter l’ADN
- Incuber 5 minutes à température ambiante
- Centrifuger 4 minutes à 12000g
- Eliminer le surnageant
- Ajouter 150µl d’une solution préparée avec 1ml de DNAzol et 750µl d’éthanol 100%
- Vortexer et incuber 5 minutes
- Centrifuger 4 minutes à 5000g
- Eliminer le surnageant
- Laver le culot avec 150µl d’éthanol 75%
- Centrifuger 4 minutes à 5000g
- Eliminer le surnageant
- Sécher les tubes sous la sorbonne
- Reprendre les ADN dans 40µl de tampon TE 1X pH8