Extraction d'ADN génomique du DNAzol

    Extraction d’ADN au DNAzol


    



    



    Cette extraction se fait sur 50mg de poudre, en utilisant du DNAzol.



    



    Protocole :



    - Ajouter 200µl dans chaque tube de poudre



    



    - Vortexer au Ribolyser, 2x20s, à vitesse maximale



    



    - Placer en agitation sur une plaque pendant 5 min



    



    - Ajouter 200µl d’un mélange chloroforme / acide isoamylique (24:1)



    



    - Vortexer



    



    - Placer en agitation sur une plaque pendant 5 min



    



    - Centrifuger 10 minutes à 12000g



    



    - Récupérer le surnageant



    



    - Ajouter 150µl d’éthanol 100%



    



    - Mélanger pour faire précipiter l’ADN



    



    - Incuber 5 minutes à température ambiante



    



    - Centrifuger 4 minutes à 12000g



    



    - Eliminer le surnageant



    



    - Ajouter 150µl d’une solution préparée avec 1ml de DNAzol et 750µl d’éthanol 100%



    



    - Vortexer et incuber 5 minutes



    



    - Centrifuger 4 minutes à 5000g



    



    - Eliminer le surnageant



    



    - Laver le culot avec 150µl d’éthanol 75%



    



    - Centrifuger 4 minutes à 5000g



    



    - Eliminer le surnageant



    



    - Sécher les tubes sous la sorbonne



    



    - Reprendre les ADN dans 40µl de tampon TE 1X pH8